(?) (?)白(Bai)介(Jie)素(Su)1β((?)IL-1β)(?)是(Shi)一(Yi)种(Zhong)重(Zhong)要(Yao)的(De)细(Xi)胞(Bao)因(Yin)子(Zi),(?)在(Zai)炎(Yan)症(Zheng)反(Fan)应(Ying)中(Zhong)起(Qi)着(Zhuo)至(Zhi)关(Guan)重(Zhong)要(Yao)的(De)作(Zuo)用(Yong)。(?)因(Yin)此(Ci),(?)对(Dui)其(Qi)进(Jin)行(Xing)准(Zhun)确(Que)和(He)灵(Ling)敏(Min)的(De)检(Jian)测(Ce)对(Dui)于(Yu)疾(Ji)病(Bing)的(De)诊(Zhen)断(Duan)和(He)研(Yan)究(Jiu)具(Ju)有(You)重(Zhong)要(Yao)意(Yi)义(Yi)。(?)白(Bai)介(Jie)素(Su)1βElisa试(Shi)剂(Ji)盒(He)的(De)制(Zhi)造(Zao)工(Gong)艺(Yi)包(Bao)括(Kuo)选(Xuan)择(Ze)高(Gao)质(Zhi)量(Liang)的(De)抗(Kang)体(Ti)、(?)制(Zhi)备(Bei)标(Biao)准(Zhun)品(Pin)、(?)优(You)化(Hua)包(Bao)被(Bei)条(Tiao)件(Jian)、(?)选(Xuan)择(Ze)适(Shi)当(Dang)的(De)酶(Mei)标(Biao)记(Ji)系(Xi)统(Tong)、(?)优(You)化(Hua)反(Fan)应(Ying)条(Tiao)件(Jian)和(He)缓(Huan)冲(Chong)体(Ti)系(Xi)以(Yi)及(Ji)确(Que)保(Bao)稳(Wen)定(Ding)性(Xing)等(Deng)关(Guan)键(Jian)步(Bu)骤(Zhou)。(?)
(?) (?)1.选(Xuan)择(Ze)高(Gao)质(Zhi)量(Liang)抗(Kang)体(Ti)
(?) (?)抗(Kang)体(Ti)特(Te)异(Yi)性(Xing):(?)选(Xuan)择(Ze)对(Dui)IL-1β具(Ju)有(You)高(Gao)特(Te)异(Yi)性(Xing)的(De)抗(Kang)体(Ti)是(Shi)制(Zhi)造(Zao)ELISA试(Shi)剂(Ji)盒(He)的(De)基(Ji)础(Chu)。(?)这(Zhe)些(Xie)抗(Kang)体(Ti)需(Xu)要(Yao)能(Neng)够(Gou)特(Te)异(Yi)性(Xing)地(Di)识(Shi)别(Bie)样(Yang)本(Ben)中(Zhong)的(De)IL-1β,(?)而(?)不(Bu)与(Yu)其(Qi)他(Ta)类(Lei)似(Si)物(Wu)发(Fa)生(Sheng)交(Jiao)叉(Cha)反(Fan)应(Ying)。(?)
(?) (?)抗(Kang)体(Ti)亲(Qin)和(He)力(Li):(?)选(Xuan)择(Ze)亲(Qin)和(He)力(Li)强(Qiang)的(De)抗(Kang)体(Ti)可(Ke)以(Yi)提(Ti)高(Gao)试(Shi)剂(Ji)盒(He)的(De)灵(Ling)敏(Min)度(Du)和(He)准(Zhun)确(Que)性(Xing)。(?)通(Tong)常(Chang)采(Cai)用(Yong)单(Dan)克(Ke)隆(Long)或(Huo)多(Duo)克(Ke)隆(Long)抗(Kang)体(Ti),(?)以(Yi)确(Que)保(Bao)与(Yu)IL-1β的(De)结(Jie)合(He)强(Qiang)度(Du)和(He)一(Yi)致(Zhi)性(Xing)。(?)
(?) (?)2.制(Zhi)备(Bei)标(Biao)准(Zhun)品(Pin)
(?) (?)纯(Chun)度(Du)要(Yao)求(Qiu):(?)标(Biao)准(Zhun)品(Pin)的(De)纯(Chun)度(Du)必(Bi)须(Xu)足(Zu)够(Gou)高(Gao),(?)以(Yi)确(Que)保(Bao)制(Zhi)备(Bei)的(De)标(Biao)准(Zhun)曲(Qu)线(Xian)准(Zhun)确(Que)可(Ke)靠(Kao)。(?)通(Tong)过(Guo)基(Ji)因(Yin)工(Gong)程(Cheng)手(Shou)段(Duan)表(Biao)达(Da)并(Bing)纯(Chun)化(Hua)IL-1β蛋(Dan)白(Bai),(?)作(Zuo)为(Wei)标(Biao)准(Zhun)品(Pin)使(Shi)用(Yong)。(?)
(?) (?)浓(Nong)度(Du)梯(Ti)度(Du):(?)制(Zhi)备(Bei)一(Yi)系(Xi)列(Lie)已(Yi)知(Zhi)浓(Nong)度(Du)的(De)标(Biao)准(Zhun)品(Pin),(?)用(Yong)于(Yu)建(Jian)立(Li)标(Biao)准(Zhun)曲(Qu)线(Xian)。(?)这(Zhe)些(Xie)浓(Nong)度(Du)应(Ying)覆(Fu)盖(Gai)预(Yu)期(Qi)的(De)样(Yang)品(Pin)浓(Nong)度(Du)范(Fan)围(Wei),(?)以(Yi)便(Bian)于(Yu)准(Zhun)确(Que)计(Ji)算(Suan)样(Yang)品(Pin)中(Zhong)的(De)IL-1β水(Shui)平(Ping)。(?)
(?) (?)3.优(You)化(Hua)包(Bao)被(Bei)条(Tiao)件(Jian)
(?) (?)包(Bao)被(Bei)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye):(?)选(Xuan)择(Ze)合(He)适(Shi)的(De)包(Bao)被(Bei)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye),(?)以(Yi)确(Que)保(Bao)抗(Kang)体(Ti)能(Neng)够(Gou)均(Jun)匀(Yun)且(Qie)稳(Wen)定(Ding)地(Di)吸(Xi)附(Fu)在(Zai)酶(Mei)标(Biao)板(Ban)上(Shang)。(?)常(Chang)见(Jian)的(De)包(Bao)被(Bei)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye)有(You)碳(Tan)酸(Suan)盐(Yan)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye)和(He)磷(Lin)酸(Suan)盐(Yan)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye)。(?)
(?) (?)包(Bao)被(Bei)时(Shi)间(Jian)和(He)温(Wen)度(Du):(?)优(You)化(Hua)包(Bao)被(Bei)时(Shi)间(Jian)((?)通(Tong)常(Chang)为(Wei)几(Ji)个(Ge)小(Xiao)时(Shi)到(Dao)过(Guo)夜(Ye))(?)和(He)温(Wen)度(Du)((?)室(Shi)温(Wen)或(Huo)4°C)(?),(?)以(Yi)确(Que)保(Bao)最(Zui)佳(Jia)包(Bao)被(Bei)效(Xiao)果(Guo)。(?)
(?) (?)4.选(Xuan)择(Ze)适(Shi)当(Dang)酶(Mei)标(Biao)记(Ji)系(Xi)统(Tong)
(?) (?)酶(Mei)标(Biao)记(Ji)二(?)抗(Kang):(?)选(Xuan)择(Ze)高(Gao)质(Zhi)量(Liang)的(De)酶(Mei)标(Biao)记(Ji)二(?)抗(Kang),(?)常(Chang)用(Yong)的(De)酶(Mei)有(You)辣(La)根(Gen)过(Guo)氧(Yang)化(Hua)物(Wu)酶(Mei)((?)HRP)(?)和(He)碱(Jian)性(Xing)磷(Lin)酸(Suan)酶(Mei)((?)AP)(?)。(?)这(Zhe)些(Xie)酶(Mei)可(Ke)以(Yi)催(Cui)化(Hua)底(Di)物(Wu)产(Chan)生(Sheng)可(Ke)检(Jian)测(Ce)的(De)信(Xin)号(Hao)。(?)
(?) (?)生(Sheng)物(Wu)*-亲(Qin)和(He)素(Su)系(Xi)统(Tong):(?)引(Yin)入(Ru)生(Sheng)物(Wu)*-亲(Qin)和(He)素(Su)系(Xi)统(Tong)可(Ke)以(Yi)提(Ti)高(Gao)检(Jian)测(Ce)的(De)灵(Ling)敏(Min)度(Du)和(He)稳(Wen)定(Ding)性(Xing)。(?)生(Sheng)物(Wu)*标(Biao)记(Ji)的(De)二(?)抗(Kang)与(Yu)包(Bao)被(Bei)抗(Kang)体(Ti)结(Jie)合(He)后(Hou),(?)再(Zai)加(Jia)入(Ru)酶(Mei)标(Biao)记(Ji)的(De)亲(Qin)和(He)素(Su),(?)形(Xing)成(Cheng)免(Mian)疫(Yi)复(Fu)合(He)物(Wu)。(?)
(?) (?)5.白(Bai)介(Jie)素(Su)1βElisa试(Shi)剂(Ji)盒(He)优(You)化(Hua)反(Fan)应(Ying)条(Tiao)件(Jian)和(He)缓(Huan)冲(Chong)体(Ti)系(Xi)
(?) (?)洗(Xi)涤(Di)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye):(?)优(You)化(Hua)洗(Xi)涤(Di)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye)的(De)配(Pei)方(Fang),(?)以(Yi)减(Jian)少(Shao)非(Fei)特(Te)异(Yi)性(Xing)结(Jie)合(He)和(He)背(Bei)景(Jing)噪(Zao)声(Sheng)。(?)通(Tong)常(Chang)包(Bao)含(Han)一(Yi)定(Ding)比(Bi)例(Li)的(De)吐(Tu)温(Wen)-20来(Lai)减(Jian)少(Shao)非(Fei)特(Te)异(Yi)性(Xing)吸(Xi)附(Fu)。(?)
(?) (?)反(Fan)应(Ying)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye):(?)选(Xuan)择(Ze)合(He)适(Shi)的(De)反(Fan)应(Ying)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye),(?)以(Yi)确(Que)保(Bao)抗(Kang)原(Yuan)-抗(Kang)体(Ti)反(Fan)应(Ying)的(De)优(You)条(Tiao)件(Jian)。(?)这(Zhe)些(Xie)缓(Huan)冲(Chong)液(Ye)通(Tong)常(Chang)包(Bao)含(Han)蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)如(Ru)BSA或(Huo)Casein,(?)以(Yi)饱(Bao)和(He)非(Fei)特(Te)异(Yi)性(Xing)结(Jie)合(He)位(Wei)点(Dian)。(?)
(?) (?)6.确(Que)保(Bao)稳(Wen)定(Ding)性(Xing)
(?) (?)储(Chu)存(Cun)条(Tiao)件(Jian):(?)确(Que)定(Ding)试(Shi)剂(Ji)盒(He)各(Ge)组(Zu)分(Fen)的(De)储(Chu)存(Cun)条(Tiao)件(Jian),(?)通(Tong)常(Chang)包(Bao)括(Kuo)2-8°C或(Huo)-20°C,(?)以(Yi)保(Bao)持(Chi)其(Qi)稳(Wen)定(Ding)性(Xing)和(He)延(Yan)长(Chang)保(Bao)质(Zhi)期(Qi)。(?)
(?) (?)质(Zhi)量(Liang)控(Kong)制(Zhi):(?)进(Jin)行(Xing)严(Yan)格(Ge)的(De)质(Zhi)量(Liang)控(Kong)制(Zhi),(?)包(Bao)括(Kuo)板(Ban)内(Nei)和(He)板(Ban)间(Jian)变(Bian)异(Yi)系(Xi)数(Shu)测(Ce)试(Shi),(?)以(Yi)及(Ji)回(Hui)收(Shou)率(Lu)实(Shi)验(Yan),(?)确(Que)保(Bao)试(Shi)剂(Ji)盒(He)的(De)精(Jing)密(Mi)度(Du)和(He)准(Zhun)确(Que)性(Xing)。(?)
上(Shang)一(Yi)篇(Pian)
乳(Ru)酸(Suan)杆(Gan)菌(Jun)探(Tan)针(Zhen)法(Fa)荧(Ying)光(Guang)定(Ding)量(Liang)PCR试(Shi)剂(Ji)盒(He)使(Shi)用(Yong)方(Fang)法(Fa) 下(Xia)一(Yi)篇(Pian)
人(Ren)I型(Xing)胶(Jiao)原(Yuan)elisa检(Jian)测(Ce)试(Shi)剂(Ji)盒(He)注(Zhu)意(Yi)事(Shi)项(Xiang)